那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下凝膠成像，經(jīng)典知識剖析（二）：
一. 多種光源可選
一般的凝膠成像系統(tǒng)，提供 302nmUV、254nmUV、365nmUV、藍(lán)光及白光光源。
① 安全防護(hù)隔離
觸摸控制電源開關(guān)、光源控制、光圈、聚焦等觀察和拍攝工作，實現(xiàn)污染現(xiàn)場和電腦操作現(xiàn)場隔離，防止交叉污染，確保操作者安全，抽屜式樣品載物臺，方便取放樣品。
② 直接切膠
凝膠成像系統(tǒng)也可直接切膠，操作應(yīng)遵循說明書的指示，尤其注意對激發(fā)光源（無論是紫外，光或者藍(lán)光）進(jìn)行相應(yīng)的防護(hù)。
二. 應(yīng)用范圍
從整體總的來說凝膠成像（系統(tǒng)）可應(yīng)用于：蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析
① 分子量定量
對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計要準(zhǔn)確很多。
② 密度定量
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
③ 密度掃描
在分子生物學(xué)和生物工程研究中，我們*常用到的是對蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統(tǒng)的方法就是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
④ PCR定量
PCR定量主要是指，如果PCR實驗擴(kuò)增出來的條帶不是一條，那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類似，但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
圖像處理界面
凝膠成像結(jié)果
三. 注意事項
1、開關(guān)抽屜時防止將EB沾在抽屜或暗箱上，如不慎沾上EB，擦干后用水沖洗；
2、透射板紫外燈壽命有限，調(diào)整圖象后及時成像；
3.、若長時間不進(jìn)行操作，機(jī)箱總電源將在10分鐘后關(guān)閉；
4、拍攝時，請注意不要將過量的緩沖液傾倒在投射底座上；
5、凝膠應(yīng)及時清理，防止凝膠固化后貼附在透射板上，造成成像不清晰；
6、實驗完畢以后請不要將暗箱式抽屜*關(guān)閉，以保證暗箱內(nèi)空氣暢通；
7、請勿用該電腦處理文檔等，如需拷貝圖片，請將移動盤格式化后再插入；
8、請注意保管好軟件加mi狗和軟件光盤，以免遺失。
以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于凝膠成像，經(jīng)典知識剖析（二）。
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